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磁珠是一类具有超顺磁性的磁纳米粒子。所谓超顺磁性，是指磁珠在外磁场的作用下具有弱磁性，容易被吸附，撤去磁场后没有剩磁，容易被分散。

磁珠的结构一般包含磁性的内核（通常为铁的衍生物）、具有良好生物相容性的外壳 以及 外壳上偶联的各种配体（如羧基、氨基等官能团或Protein A/G、抗体等生物大分子）。下图为羧基磁珠示意图。

磁珠之所以能在蛋白互作上大显身手，突出的特点就是蛋白荷载量高，特异性强，样品损失小，操作便捷。总之就是简单加方便！

1. 磁珠与样品共同孵育，捕获目的蛋白；

2. 加外磁场吸附磁珠，弃掉上清液；

3. 加入漂洗液漂洗，去掉非特异结合蛋白；

4. 加入洗脱液洗脱，收集目的蛋白。

蛋白纯化磁珠常用的配体有Protein A、Protein G、Protein A/G、标签蛋白抗体、链霉亲和素蛋白等。

Protein A/G磁珠是在磁珠表面偶联Protein A/G，而Protein A/G能与IgG相结合，因此可以用来纯化各种抗体。Protein A/G磁珠也可以通过结合不同的抗体，形成“磁珠-抗体-抗原”复合物，从而捕获相应的抗原或互作蛋白。

Protein A/G磁珠工作原理图

相同工作原理的磁珠还有Protein A磁珠和Protein G磁珠。Protein A和Protein G以及Protein A/G在与不同抗体亚型的结合能力上有所差别，选择时可以参照下表。Protein A/G由于是Protein A和Protein G抗体识别区域的重组融合蛋白，因此通常在实验中表现更佳。

需要注意的是，Protein A能与抗体Fc端特异性结合，Protein G不仅能与Fc端结合，还能低亲力与Fab端特异性结合。

所以需要纯化抗体Fab端的小伙伴，可以选择Protein A磁珠特异性去除Fc端，这样就可以获得Fab端啦！

另外，我司还提供一种琼脂糖磁珠，与普通磁珠相比，琼脂糖磁珠的IgG蛋白荷载量更高，更适合用来纯化大量的IgG。

根据抗原抗体结合的特异性，研究者将抗体直接与磁珠偶联，获得抗体偶联磁珠，如anti-Flag免疫磁珠、anti-Myc免疫磁珠等，可以用来直接捕获对应的抗原。

与ProteinA/G磁珠相比，抗体偶联磁珠不用考虑抗体种属以及亚型的选择，操作上也少了磁珠和抗体结合的步骤，大大缩短实验时间。目前大部分磁珠偶联的抗体为通用的标签蛋白抗体，包括Flag、HA、Myc、GST、His等，因此更适合用来捕获外源表达的标签融合蛋白。

用Protein A/G磁珠做免疫沉淀试验（IP）时，没有捕获到目的蛋白？

在IP过程中出现非特异性条带如何处理？

进行Protein A/G磁珠和抗体偶联磁珠的回收时，需要注意哪些问题？

Protein A/G磁珠和抗体偶联磁珠回收步骤有哪些？